可見(jiàn)分光光度計(jì)的用途及原理概述
更新時(shí)間:2022-03-28 點(diǎn)擊次數(shù):5308
可見(jiàn)分光光度計(jì)是一種結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)潔、使用方便的單光束分光光度計(jì),基于樣品對(duì)單色光的選擇吸收特性可用于對(duì)樣品進(jìn)行定性和定量分析。其定量分析根據(jù)相對(duì)測(cè)量原理工作,即選定樣品的溶劑(或空氣 )作為標(biāo)準(zhǔn)試樣,設(shè)定其透射比為100%,被測(cè)樣品的透射比則相對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)試樣(或空氣)而得到。基本原理:當(dāng)一束單色光照射待測(cè)物質(zhì)的溶液時(shí),當(dāng)某一定頻率(或波長(zhǎng))的可見(jiàn)光所具有的能量(hf)恰好與待測(cè)物質(zhì)分子中的價(jià)電子的能級(jí)差相適應(yīng)(即ΔE=E2-E1=hf)時(shí),待測(cè)物將對(duì)該頻率(波長(zhǎng))的可見(jiàn)光產(chǎn)生選擇性的吸收。用可見(jiàn)分光光度計(jì)可以測(cè)量和記錄其吸收程度(吸光度)。由于在一定條件下,吸光度A與待測(cè)物質(zhì)的濃度C及吸收地長(zhǎng)度l的乘積成正比,即A= KCL,所以,在測(cè)得吸光度 A后,可采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法、比較法以及標(biāo)準(zhǔn)加入法等方法進(jìn)行定量分析。
可見(jiàn)光度計(jì)(又名可見(jiàn)分光光度計(jì)、分光光度計(jì))開(kāi)發(fā)出能夠進(jìn)行定量測(cè)量(標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)量,可對(duì)物質(zhì)進(jìn)行濃度直讀);上海美析儀器動(dòng)力學(xué)測(cè)試(測(cè)出物質(zhì)濃度隨時(shí)間變化OD值的變化);光譜掃描(可以對(duì)某一種物質(zhì)進(jìn)行全波段掃描,分析物質(zhì)的特征波長(zhǎng),判斷實(shí)驗(yàn)過(guò)程的誤差);還有可以進(jìn)行DNA/蛋白質(zhì)測(cè)試、總磷總氮測(cè)試、重金屬測(cè)試、農(nóng)藥殘留測(cè)試、食品安全檢測(cè)、熱力發(fā)電金屬離子測(cè)試等等,廣泛應(yīng)用于食品、藥品、電力、生物研究、教學(xué)科研、化學(xué)化工、質(zhì)量監(jiān)督、水質(zhì)環(huán)保和商檢等各大領(lǐng)域。
可見(jiàn)分光光度計(jì)的作用,主要是測(cè)定有色溶液中測(cè)定物質(zhì)的吸光度。
具體應(yīng)用是使用在:依據(jù)朗伯比爾定律(A=kbc)測(cè)定物質(zhì)的吸光度A值,進(jìn)行定量的目的。
可見(jiàn)分光光度計(jì)是有光源(鎢絲燈發(fā)出連續(xù)光譜)、比色皿(裝有色溶液)、單色器(給出單色光)、檢測(cè)器(讀出吸光度值)。
工作原理如下:由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見(jiàn)輻射光后,發(fā)生了電子能級(jí)躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同,因此,每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線,根據(jù)這一特性,可對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性分析。由于物質(zhì)濃度的不同,吸收光譜上的某些特征波長(zhǎng)處的吸光度也不相同,從而通過(guò)對(duì)物質(zhì)吸光度或透過(guò)率的測(cè)量判定該物質(zhì)的含量。
基本用途:廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥衛(wèi)生、臨床檢測(cè)、生物化學(xué)、石油化工、環(huán)保監(jiān)測(cè)、食品生產(chǎn)和質(zhì)量控制等部門(mén)作定性、定量分析,還可作為大、專院校和中學(xué)相關(guān)課程的教學(xué)演示和實(shí)驗(yàn)儀器。基礎(chǔ)參數(shù):波長(zhǎng)范圍: 200-1000nm 波長(zhǎng)重復(fù)性:0.5nm;波長(zhǎng)精度: ±1.0nm 光度精度:±0.5%T;光譜帶寬: 2nm 波長(zhǎng)顯示:LCD2×20bit;精確至0.1nm;雜散光 ≤0.2%T 220nm\340nm處;穩(wěn)定性: ±0.002A/小時(shí) 500nm。注意事項(xiàng):每天使用結(jié)束后,應(yīng)仔細(xì)檢查樣品室內(nèi)是否有溶液溢出,若有溢出必須隨時(shí)用濾紙吸干;儀器使用完畢,用防塵套罩住。