氨基色譜柱，全稱氨丙基鍵合硅膠色譜柱，在HPLC中既可以作為反相色譜柱，又可以作為正相色譜柱.使用者在進(jìn)行正反相轉(zhuǎn)換操作過(guò)程中一定要注意以下幾項(xiàng)：

對(duì)于新購(gòu)買到的柱子，首先請(qǐng)注意打開(kāi)分析測(cè)試說(shuō)明書(shū)，了解柱子的保存溶劑。如果保存溶劑與你將要使用的流動(dòng)相極性不同不會(huì)互溶，請(qǐng)先用異丙醇過(guò)渡。過(guò)渡過(guò)程中注意因異丙醇粘度較大，會(huì)導(dǎo)致柱壓很高，適當(dāng)調(diào)低流速即可。如果要使用的流動(dòng)相中還含有緩沖鹽類，建議在用分析流動(dòng)相之前，先用不含緩沖鹽的同比例流動(dòng)相過(guò)渡，這樣可避免緩沖鹽在分析柱內(nèi)的析出。
柱效檢測(cè)：
    我用于判斷一個(gè)用戶是否有經(jīng)驗(yàn)的指標(biāo)之一，是用戶是否習(xí)慣配制一些柱效檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)溶液。說(shuō)到柱效檢測(cè)，我可以向大家提供一個(gè)方法，而且很通用，你也可以用同樣的標(biāo)準(zhǔn)溶液和流動(dòng)相來(lái)檢測(cè)硅膠柱和氰基柱。
流動(dòng)相：
10％乙酸乙酯＋90％正己烷 流速1.0
標(biāo)準(zhǔn)溶液：
乙苯（如乙苯找不動(dòng)就用甲苯代替唄）＋苯甲酸甲酯
檢測(cè)波長(zhǎng)254nm
    這個(gè)方法特別適用于新購(gòu)柱子（新購(gòu)柱子往往保存在正相溶劑中）時(shí)即進(jìn)行檢測(cè)，如有問(wèn)題，可及時(shí)與供應(yīng)商溝通。也適合在柱子在準(zhǔn)備放置相當(dāng)長(zhǎng)一段時(shí)間之前進(jìn)行充分清洗后進(jìn)行檢測(cè)作為記錄留檔。在平常的使用過(guò)程中，如果分析物是固定重復(fù)的，我們當(dāng)然可以從對(duì)分析物的分離分析情況來(lái)作出判斷；但如果分析物和分析條件不同時(shí)，定期檢測(cè)柱效可以避免柱效下降導(dǎo)致分離不佳再分析查找原因這樣浪費(fèi)人力物力的過(guò)程。不過(guò)特別要注意的是，當(dāng)氨基柱（或氰基柱）在反相條件中使用時(shí)，如用該條件檢測(cè)，請(qǐng)注意流動(dòng)相的換相過(guò)渡問(wèn)題。
氨基柱的使用：
    需要注意的是，氨基柱的鍵合官能團(tuán)氨丙基要比C18,C8柱的鍵合官能團(tuán)C18,C8要容易水解，所以首先要做好其使用壽命稍遜的心理準(zhǔn)備，特別是當(dāng)你的使用條件是反相條件下時(shí)。
    反相條件下使用時(shí)，要特別注意控制PH值范圍，PH值越低越有發(fā)生水解的危險(xiǎn)，流動(dòng)相中水的比例越高當(dāng)然也越有發(fā)生水解的危險(xiǎn)。所以，在使用后以及準(zhǔn)備長(zhǎng)時(shí)間放置該柱時(shí)，必要的清洗和將氨基柱保存于純的有機(jī)溶劑中是很好的保養(yǎng)措施。
    有一種情況是，當(dāng)使用氨基柱進(jìn)行酸性物質(zhì)如果汁的分析時(shí)（分析其中的糖份），酸性物質(zhì)的存在意味著質(zhì)子的存在，可能會(huì)使略帶負(fù)電荷的氨基官能團(tuán)質(zhì)子化，導(dǎo)致使用一段時(shí)間后對(duì)于某些類的分析物保留性質(zhì)有所改變或表現(xiàn)在柱效下降。這時(shí)，Kromasil專家所給的建議是：用5-10倍的柱體積的含0.5- 1.0％NH3的50-50乙腈-水溶液沖洗該柱（沖洗后當(dāng)然要再用不含堿的流動(dòng)相洗去多余氨），之后再進(jìn)行分析這類酸性分析物時(shí)建議在流動(dòng)相中略微添加少許氨如0.1％。
氨基柱的清洗
    簡(jiǎn)單說(shuō)起來(lái)，正相條件下使用的氨基柱你就參照硅膠柱的清洗方法；反相條件下使用的氨基柱你就參照C18的清洗方法。
平時(shí)在正相條件下使用：
    首先用50倍柱體積的異丙醇清洗，因異丙醇粘度較大可適當(dāng)放低流速；之后，用50倍的甲醇清洗；之后，用異丙醇過(guò)渡回到平常使用的正相流動(dòng)相，即可。
平時(shí)在反相條件下使用：
    緩沖鹽應(yīng)及時(shí)沖洗，以及不能直接用純甲醇沖洗緩沖鹽等，屬常識(shí)就不作特別交待了。
用50倍純甲醇沖洗；之后，用異丙醇過(guò)渡后，用二氯甲烷沖洗色譜柱；之后，再用異丙醇過(guò)渡回來(lái)到甲醇條件下。
這些清洗方法，主要是針對(duì)當(dāng)樣品中有雜質(zhì)逐步吸附累積到填料上時(shí)的處理方法，色譜柱表現(xiàn)行為為諸如柱壓增高柱效降低等
LUNA氨基柱的使用方法
1.氨基柱既可以正相使用，也可以反相使用，但是要注意到的是：正相溶劑和反相溶劑往往是不互溶的，正常情況新氨基柱保存在正相環(huán)境中，例如LUNA
氨基柱保存在正己烷-乙腈（99：1）中。
2. 正相使用
2.1
    新柱子可直接用流動(dòng)相。推薦先用正己烷-乙腈（99：1）以0.5ml/min的流速?zèng)_10倍柱體積，再根據(jù)流動(dòng)相選用極性相近的氯仿或二氯甲烷以相同的流速?zèng)_10倍柱體積，zui后換成流動(dòng)相。
2.2
    正相使用時(shí)，不宜分析含醛基、羰基的化合物，不可用于還原糖的分析；流動(dòng)相要*脫氣，并不得含有羰基化合物和過(guò)氧化物2.3 任何時(shí)候更換流動(dòng)相時(shí)都要確保新流動(dòng)相與柱子原保存液可互溶。
3 反相使用
3.1
    先用正己烷-乙腈（99：1）以0.5ml/min的流速?zèng)_10倍柱體積，再依次以相同的流速相同的用量用氯仿、異丙醇、甲醇、甲醇-水（50：50）沖柱子。
3.2
    以0.5ml/min的流速用30倍柱體積的pH11.0的氫氧化鈉（LUNA）水溶液沖柱子（注意pH值切不可超過(guò)11.0），立即用水（
0.5ml/min的流速，30倍柱體積）沖洗，再換成流動(dòng)相。
3.3
    配制流動(dòng)相時(shí)，應(yīng)各組分分別量取，比例較小的組分要精密量取，需調(diào)pH值時(shí)要精密到0.1。
3.4
    反相條件下使用時(shí)，要特別注意控制pH值范圍，pH值越低越有發(fā)生水解的危險(xiǎn)，流動(dòng)相中水的比例越高當(dāng)然也越有發(fā)生水解的危險(xiǎn)。的pH范圍在pH
3.0-7.0
3.5
    如果要使用的流動(dòng)相中還含有緩沖鹽類，建議在用分析流動(dòng)相之前，先用不含緩沖鹽的同比例流動(dòng)相過(guò)渡，這樣可避免緩沖鹽在分析柱內(nèi)的析出。
3.6
    有一種情況是，當(dāng)使用氨基柱進(jìn)行酸性物質(zhì)的分析時(shí)，酸性物質(zhì)的存在意味著質(zhì)子的存在，可能會(huì)使略帶負(fù)電荷的氨基官能團(tuán)質(zhì)子化，導(dǎo)致使用一段時(shí)間后對(duì)于某些類的分析物保留性質(zhì)有所改變或表現(xiàn)在柱效下降。建議：用5-10倍的柱體積的含0.5-1.0％NH3的乙腈-水（50:50）溶液沖洗該柱（沖洗后當(dāng)然要再用不含堿的流動(dòng)相洗去多余氨），之后再進(jìn)行分析這類酸性分析物時(shí)建議在流動(dòng)相中略微添加少許氨如0.1％。
4
    色譜柱的沖洗：簡(jiǎn)單說(shuō)起來(lái)，正相條件下使用的氨基柱就參照硅膠柱的清洗方法；反相條件下使用的氨基柱就參照C18的清洗方法。
5 色譜柱的保存
5.1
    正相使用時(shí)，將柱子沖洗干凈后，用正己烷-乙腈（99：1）保存。
5.2
    反相使用時(shí)，如短期不用，可用甲醇或乙腈保存；長(zhǎng)期不用時(shí)需將甲醇依次用異丙醇、氯仿